MicroRNA-Enhanced mRNA Reprogramming System
产品信息
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Product Name |
Cat. No. |
Size |
Storage |
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Stemgent® mRNA Reprogramming Kit |
00-0071 |
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Kit Contents: |
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mRNA Reprogramming Factors Set: hOKSM |
7×200 μl |
-70℃ |
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B18R Recombinant Protein (0.5 mg/ml) |
80 μl |
-70℃ |
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Pluriton™ Reprogramming Supplement (2500×) |
0.2 ml |
-70℃ |
|
Pluriton™ Reprogramming Medium |
500 ml |
-20℃ |
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Stemgent® microRNA Booster Kit |
00-0073 |
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Kit Contents: |
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microRNA Reprogramming Cocktail |
2×35 μl |
-70℃ |
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B18R Recombinant Protein (0.5 mg/ml) |
80 μl |
-70℃ |
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Stemgent® Stemfect™ RNA Transfection Kit |
00-0069 |
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Kit Contents: |
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Stemfect™ RNA Transfection Reagent |
750 μl |
4℃ |
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Stemfect™ Buffer |
35 ml |
4℃ |
※ 上述三个试剂盒联合使用，能够满足9-10个Well（6-well plate format）内靶细胞的重编程。
产品特点
1.快速 Fast
Stemgent® MicroRNA-Enhanced mRNA Reprogramming System只需2周即可将靶细胞重编程为iPS细胞，与仙台病毒（Sendai Virus）、非整合型DNA载体（Episomal DNA Vectors）等传统iPS重编程方法相比，缩短实验周期超过50%以上（Figure. 1）。
Figure 1. Stemgent® mRNA重编程系统、仙台病毒依赖的重编程系统以及游离型DNA载体依赖的重编程系统重编程时程比较。
简便 Easy
与病毒、DNA载体依赖的iPS重编程手段不同，使用Stemgent® MicroRNA-Enhanced mRNA Reprogramming System对靶细胞进行重编程，生成的iPS细胞无需进行复杂耗时的下游筛选程序，只需简简单单6个步骤，即可轻松构建iPS细胞系。
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Description |
Day |
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Step 1 |
Material Preparation |
Prior to starting |
|
Step 2 |
Plate Cells |
0 |
|
Step 3 |
Transfect Cells |
1 to 12 |
|
Step 4 |
Identify Cells |
13-14 |
|
Step 5 |
Pick and Passage iPS Cell Colonies |
15-16 |
|
Step 6 |
Maintain iPS Cell Cultures |
16+ |
注：因所用细胞类型及实验条件不同，上述时间轴可能略有不同，仅供参考。
Figure 2. Stemgent® MicroRNA-Enhanced mRNA Reprogramming System重编程过程时间表、显微镜下观察到的重编程过程中靶细胞形态变化。第12天，形成的iPS克隆表达多能型Marker TRA-1-81。
高效 Efficient
病毒、DNA载体等依赖的iPS重编程技术，其重编程效率介于0.00001%到1%之间不等，而Stemgent® MicroRNA-Enhanced mRNA Reprogramming System的重编程效率远远大于1%，极大地提高了iPS克隆的产出率。
表1. 不同类型iPS重编程手段效率比较
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Reprogramming Method |
Efficiency |
Integrating |
Screening |
|
RNA |
>1% |
No |
No |
|
仙台病毒（Sendai virus） |
0.01-1% |
No |
Yes |
|
DNA载体（Episomal/Minicircle） |
0.00% |
Possible |
Yes |
|
慢病毒（Lentivirus） |
0.001-0.01% |
Yes |
Yes |
|
腺病毒（Adenovirus） |
0.0001-0.001% |
Possible |
Yes |
|
Protein |
0.00% |
No |
No |
安全 Safe
某些iPS研究领域，例如iPS临床研究、治疗应用等，对iPS细胞的安全性提出了极高的要求。使用Stemgent® MicroRNA-Enhanced mRNA Reprogramming System重编程靶细胞，无需担心构建的iPS细胞系可能含有病毒载体残留，亦无需担心无关的基因整合进宿主基因组，是目前适用于临床研究及治疗的最理想选择。
而以仙台病毒（Sendai Virus）为载体的iPS重编程手段，其病毒基因组虽然不会整合进宿主染色体，仙台病毒本身也不具备复制能力，但是为了构建真正意义上的virus-free的iPS细胞系，通常需要经过一个10-20代、耗时费力的筛选过程，以确保最终得到的iPS细胞系无病毒载体残留。以慢病毒（Lentivirus）体的iPS重编程手段，病毒基因组能够永久整合进宿主基因组，会给后续的iPS细胞分析带来干扰。
高性价比 Cost Effective
以仙台病毒为载体的iPS重编程试剂盒非常昂贵，综合重编程效率、时间及劳动力成本、安全性等多重考虑，Stemgent® MicroRNA-Enhanced mRNA Reprogramming System无疑是性价比的上乘之选。
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Supplier |
Product Name |
Cat. No. |
Size |
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Stemgent |
eGFP mRNA |
05-0020 |
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HumanZyme |
bFGF, Human Recombinant |
HZ-1259 |
50 μg |
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ScienCell
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Human Dermal Fibroblasts
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2300
2310
2320
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5×10^5 cells
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Cell
Applications
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Human Dermal Fibroblasts
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106K-05f
106K-05n
106K-05a
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1 kit
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Stemgent
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TRA-1-60 Antibody (DyLight™ 488, PE, Purified), Mouse anti-Human
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09-0068
09-0009
09-0010
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100 µl
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TRA-1-80 Antibody (DyLight™ 488, Purified), Mouse anti-Human
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09-0069
09-0011
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100 µl
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09-0020 |
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09-0097
09-0003
09-0006
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100 µl
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|
Stemgent |
c-Myc mRNA, Human |
05-0018 |
20 ug |
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